近日，betway体育下载 、北京希諾穀生物科技有限公司與中國農業大學合作，將CRISPR/Cas9與體細胞核移植技術相結合，成功構建出世界首個基因敲除體細胞克隆狗模型。該研究成果以封麵文章發表在Journal of Genetics and Genomics雜誌上。

狗是人類最早馴化的動物之一，千百年來，狗作為人類的同伴，被用於看家護院、狩獵、導盲、警用及救援等工作。狗在營養代謝、生理解剖等方麵與人類極其相似，且發現狗有200多種遺傳疾病與人類的遺傳疾病相似，因此狗也是研究人體生理和疾病發生機理的理想實驗動物，CRISPR/Cas9與體細胞核移植技術的結合，使得構建更多模擬人類複雜疾病的模型成為可能，這將為開發人類疾病新的治療手段和藥物提供新的實驗動物模型，同時也將加速培育出更多含優遺傳良性狀狗的新品種。

研究團隊選取ApoE基因用於構建心血管疾病模型，為動脈粥樣硬化研究提供更有效的大動物模型。首先，與之前構建MSTN基因敲除狗的方法一樣，通過在狗的受精卵胞質中注射mRNA對犬的ApoE基因進行編輯，最終成功獲得2隻ApoE基因敲除狗，“蘋果”（公犬）和“葫蘆”（母犬）。雖然2隻基因敲除狗在ApoE基因位點上都進行了編輯，但2隻狗的基因編輯方式是不一樣的，其中“葫蘆”的編輯方式並未造成移碼突變，不是理想的模型。

為解決CRISPR/Cas9受精卵胞質注射方法存在的基因編輯方式不一樣的問題，研究人員接著進行了體細胞克隆的實驗。ApoE基因敲除犬“蘋果”的耳部皮膚成纖維細胞作為核移植供體細胞進行體細胞克隆，移植代孕受體4隻，其中2隻成功懷孕並分娩產下3隻幼犬，分別取名為“龍龍”，“希希”和“諾諾”。這標誌著我國繼韓國之後第二個獨立掌握犬體細胞克隆技術的國家，同時也是世界首例基因敲除體細胞克隆犬。將CRISPR/Cas9與體細胞克隆技術相結合，可以短時間內獲得大量具有相同遺傳背景的動物模型。通過這一技術成功的在6個月內獲得3隻與“蘋果”具有相同遺傳信息的動脈粥樣硬化模型狗。

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基因敲除體細胞克隆狗模型